Sistemul Vacutainer reprezintă o metoda de recoltare de sânge pentru analize de laborator care asigura confortul bolnavului, calitatea probei recoltate si securitatea personalului medical. Vacutainer® este o marcă înregistrată a Becton Dickinson (BD), care fabrică și vinde astăzi tuburile.
BD Vacutainer este tubul cel mai frecvent utilizat pe plan mondial.
Calitatea fazei preanalitice are impact asupra rezultatelor clinice.
Cand se pune problema recoltarii sangelui, majoritatea erorilor intervin in faza preanalitica intrucat este un proces complex implicand multe persoane, din diverse locatii. Erorile preanalitice sunt o problema semnificativa, afectand rezultatele testelor.
Intrunirea standardelor de laborator, precum ISO15189, cere laboratoarelor sa documenteze, sa masoare si sa monitorizeze in mod regulat procedurile lor de colectare si manipulare corecta a probelor.
Cum pot deci laboratoarele, deja foarte solicitate, sa echilibreze furnizarea unor probe de calitate in concordanta cu cerintele clinice si bugetare, iar in aceste conditii sa fie increzatoare ca sistemele si procesele lor functioneaza efectiv?
Prin furnizarea instruirii si a educatiei in ceea ce priveste procesul de recoltare a sangelui.
In plus, obtinerea conformitatii si a bunelor practici poate fi dificila, iar fluctuatia personalului face sarcina chiar mai grea. Instruirea in bunele practici preanalitice e un program conceput si pus in practica de specialistii BD si contine o serie de module ce sustin cele mai bune practici in faza preanalitica a colectarii probei.
O scurta descriere a fazei preanalitice*
Dezinfectia tegumentelor
Risc redus de infectie la recoltarea de sange: dezinfectantul cutanat va fi lasat sa actioneze 30 de secunde.
Risc mediu de infectie: in cazul canulelor utilizate timp indelungat sau a cateterelor, precum si la recoltarea pentru hemocultura pentru a evita contaminarea: dezinfectantul cutanat va fi lasat sa actioneze 30 de secunde, apoi se va repeta dezinfectia.
Risc inalt de infectie: in cazul punctiilor articulare si a punctionarii altor cavitati ale organismului: dupa curatarea tegumentelor, eventual indepartarea parului si degresare, dezinfectantul se va lasa sa actioneze 2,5 minute, iar apoi se va repeta dezinfectia (timpul total de actiune 5 minute) cu manusi sterile, masac orala.
Tipurile de probe si recoltarea lor:
Definitie:
Specimen: proba c etrebuie examinata
Analit: component al probei, a carui natura si concentratie urmeaza a fi determinate (parametru, component)
Procedura:
Analizele calitative identifica prezenta/absenta unei anumite substante intr-o, ddar nu precizeaza cantitatea acesteia.
Analizele semicantitative indica cantitatea, concentratia sau activitatea substantei respective, dar de o maniera imprecisa.
Analizele cantitative indica cantitatea exacta, concentratia sau activitatea substantei investigate sub forma de valori relative sau absolute.
Sange:
Sange integral: venos, arterial, capilar
- Pentru obtinerea plasmei (sange fara elemente corpusculare: 92-94% ser, 6-8% proteine plasmatice) se utilizeaza substante anticoagulante, precum EDRA, citrat, heparina Na/Nh/Li si NaF. Se amesteca sange nativ cu anticoagulant si dupa 10 minute se centrifugat la 2 000 g timp de 10 minute. Supernatantul obtinut este plasma.
- Avantaje ale plasmei: coagularea nu trebuie asteptata (acest lucru economiseste timp, aproximativ 30 de minute), randament material cu 10-20% mai mare, evitarea modificarilor legate de coagulare, nu apare coagularea post-centrifugare.
- Dezavantaje: contaminarea cu cationi, formarea de complexe a metalelor datorita EDTA si a citratului (inhibarea activitatii fosfatazei alcaline si a amilazei), electroforeza proteinelor se poate face doar dupa o prelucrare prealabila.
- Pentru a obtine ser (plasma fara substante consumate la coagulare, in special fara fibrinogen) sunt de obicei utilizati aditivi pro-coagulanti, cum af fi microsfere de activare a coagularii: sangele nativ este lasat in repaus pana la expirarea coagularii spontane, aproximativ 30min, urmata de o centrifugare timp de 10 minute la 2 000 g. Supernatantul obtinut corespunde serului.
Sange capilar: proaspat, heparinizat, deproteinizat, hemolizat; recoltare: pulpa degetului inelar punctionare pe fata laterala externa (fibre nervoase senzitive!), se va indeparta prima picatura de sange de dimensiunea unei gamalii si apoi se umple, in functie de necesitate fie capilar, fie se incarca banda de testare, fara a o atinge direct cu degetul. Acest lucru poate fi sustinut de un usor masaj al degetului de la radacina spre varf, apasarea si compresiunea ar putea duc ela scurgeri de fluid tisular si trebuie evitate. Recoltarea se poate face, de asemenea, din lobul urechii, iar la nou-nascuti de la calcai.
Anticoagulante folosite pentru obtinerea plasmei si utilizarea lor
EDTA (etilendiamintetraacetat)
Antigoagulant prin complexare cu calciu. EDTA este folosit ca di-potasiu, tri-potasiu si sare disodica. Pe lang acalciu sunt complexati si alti ioni bivalenti, cum ar fi magneziul si cuprul. Activitatea unor metaloenzime, care este cuplata cu ionii bivalenti, cum ar fi FA si alfa-amilaza este afectata, respectiv redusa. Mai mult, unii factori de coagulare (V, VIII) sunt inactivati si este perturbata polimerizarea fibrinei, motiv pentru care EDTA nu este adecvata pentru analiza coagularii. Se utilizeaza in hematologie si in analiza liproproteinelor. Efectul de dilutie este < 1 %.
Citratul
Citratul trisodic se leaga de ionii de Ca2. Acesta este utilizat ca anticoagulant pentru efectuarea tuturor probelor de coagulare. Raportul de amestecare de 1:10 (1 parte citrat: 9 parti de sange) trebuie sa fie respectat intocmai, in scopul obtinerii de rezultate utile. Chiar si mici abateri conduc la valori semnificativ eronate. Testele trebuie sa fie efectuate in interval de 2 ore. Se utilizeaza si pentru determinarea vitezei de sedimentare a hematiilor, raportul de amestecare fiind de 1:5 (1 parte citrat: 4 parti de sange). VSH ar trebui determinat in decurs de 4 ore de la recoltare.
Heparina
Heparina inhiba activarea protrombinei in trombina, scindarea fibrinogenului in fibrina si stabilizeaza plachetele, ceea ce face ca procesul de coagulare sa fie inhibat.
Aproape toti parametrii clinico-chimic pot fi determinati din plasma heparinata. Exceptie fac amoniacul si fosfataza acida din vacutainerul (tubul) cu heparinat de amoniu respectiv litiul si fosfataza acida din tubul cu heparinat de litiu. De obicei sunt determinati electrolitii, substraturile, enzimele si se executa din plasma heparinata analiza gazelor sanguine.
Fluorura
Fluorura de sodiu este utilizata ca si inhibitor al glicolizei impreuna cu anticoagulant (EDTA/oxalat) pentru determinarea glucozei sau lactatului. Prin eliminarea ionilor de Mg2+ sunt inhibate enzime ale glicolizei, in special enolaza. La temperatura camerei, stabilitatea nivelului glucozei este asigurata timp de 24 de ore.
Particularitati
- Tuburile de coagulare: trebuie sa fie umplute exact pana la marcaj, pentru a tine cont la comunicarea rezultatelor de diluarea probei prin anticoagulantul aflat deja in tub;
- Produsi de degradare ai fibrinei/fibrinogenului (FDP): Pentru a evita aparitia in vitro de produsi generati de degradare, este necesara o coagulare rapida si completa.
- Transport > 1 h sau stocare indelungata: necesitatea separarii serului/plasmei si a coagulului sanguin.
- Determinarea grupei sanguine: sange venos integral (eritrocitele si serul sunt necesare), fara utilizarea de anticoagulant (anticoagulantele pot perturba reactia Atg – Atc.);
- Electroforeza proteinelor: determinarea obligatorie din ser, deoarece fibrinogenul continut in plasma ar putea simula o paraproteina monoclonala.
- Electroforeza lipoproteinelor: nu se poate efectua din plasma heparinizata, deoarece lipoproteinele sunt precipitate de heparina.
Ordinea recoltarii la prelevarea de sange venos:
- Hemoculturi;
- Sange nativ (ser);
- Sange citrat;
- Sange EDTA;
- Sange cu fluorura;
In special, tuburile de coagulare datorita eliberarii de factori tisulari prin punctie, nu trebuie sa fie primele. Tuburile native vor fi utilizate, pentru a evita contaminarea, intotdeauna inaintea tuburilor cu aditivi. Este obligatorie amestecarea imediata a continutului tuburilor cu citrat de cel putin 3 ori prin rasturnare, fara a le agita.
Urina
Urina spontana: urina rezultata in urma mictiunii spontane, de obhicei este utilizata pentru sumarul de urina.
Urina recoltata din jetul urinar mijlociu: pentru examenul bacteriologic orientativ cea mai adecvata este urina matinala. Ultima mictiune trebuie sa fi fost cu cel putin 3 ore inainte.
Procedura: pacientul isi spala mainile, organele genitale sunt curatate cu tampoane sterile inmuiate in apa. Prima parte din aproximativ 50 ml de urina este aruncata in toaleta, fara a intrerupe fluxul urinar, apoi, aproximativ 50 ml se colecteaza intr-un recipient de transport pregatit anterior si se trimite la laborator cu mijloace de transport expres.
Urina recoltata prin sonda: urina este prelevata cu ajutorul uni cateter. Datorita potentialului contaminarii cu germeni, acest tip de recoltare ar trebui utilizat doar intr-o masura limitata.Indicatia o reprezinta mai ales testele bacteriologice. Mai ales la femei, urina spontana este de multe ori contaminata cu bacterii prin intermediul florei vaginale si rectale.
Urina colectata: pentru analize cantitative se colecteaza urina pe 24 de ore, de obicei de la ora 8:00 pana la ora 18:00, ziua urmatoare. Initial se goleste vezica urinara si urina se arunca. Apoi incepe colectarea urinii si la sfarsitul perioadei de colectare vezica este din nou golit in vasul de colectare.
Volumul colectat trebuie raportat, apoi urina colectata este amestecata bine si se trimite cantitatea la laborator pentru determinari. Pot fi necesare containere speciale sau aditivi pentru unele masuratori. In timpul fazei de colectare, urina ar trebui sa fie pastrata la rece si ferita de lumina.
LCR
Recoltare, de obicei, prin punctie lombara. Primele 5 picaturi sunt indepartate, apoi se colecteaza 5-10 ml (3-5 ml la copii). Lichidul cefalorahidian trebuie examinat in termen de o ora dupa recoltare, deoarece celulele din LCR in vitro pastrate mai mult de (> 2 h) tind spre citoliza si leucocitele nu mai pot fi diferentiate.
Altele
Alte materiale biologice importante pentru analize sunt: saliva, secretia gastrica, sectretia duodenala, bila, scaunul, sputa, maduva osoasa, exsudatul, transsudatul, sperma, lichidul sinovial.
Transportul probelor
Probele din excretiile umane si din fluidele organismului ar trebui considerate potential infectioase si necesita transport in recipiente stabile, bine sigilate. Pentru transportul pe distante mai lungi, cum ar fi de exemplu prin posta, ar trebui sa fie utilizate recipiente rezistente, opace sau ambalaje de protectie si materiale absorbante. In unele cazuri, este necesar un transport cu temperatura controlata (cald, rece sau congelat).
Posibile erori
Factorii variabili pe termen scurt si sursele de erori evitabile includ, de exemplu erori la pregatirea pacientului inainte de recoltarea sangelui, recoltarea in sine, precum si depozitarea si transportul. Nerespectarea variatiei diurne a unor parametri (de exemplu, cortizonul), momentului corespunzator de prelevare a probelor de sange (de exemplu, cresterea enzimelor cardiace la cateva ore dupa un infarct miocardic la valorile patologice), hemoliza artificiala, amestecarea insuficienta a probei, decantarea tardiva, contaminarea sau diluarea accidentala a materialului pot fi cauze de rezultate eronate. Mai mult decat atat, nutritia si carenta alimentara, activitatea fizica si imobilizarea, stresul, medicamentele, bolile si investigatiile in scop diagnostic influenteaza parametrii de laborator.
Factorii pe termen lung sau factorii neinfluentabili nu pot fi evitati, dar trebuie luati in considerare la interpretarea rezultatelor. Acestia includ, de exemplu, varsta, sexul, greutatea corporala, originea etnica, faza ciclului menstrual si, eventual, sarcina, clima, altitudinea, masa musculara, statutul socio-economic si stilul de viata.
Factori de confuzie: prin factori de confuzie se inteleg componente ale probei, care prin interferente metodologice determina o concentratie incorecta a componentelor din proba de analizat. Hemoliza, icterul sau lipemia interfereaza cu mai multe metode de analiza. De asemenea, medicamentele, anticorpii, antigenele si substantele radioactive pot influenta determinarile.
Exemple concrete de influentare a parametrilor de laborator:
- efort fizic: CK ↑;
- imobilizare: creatinina ↓, CK ↓, cresterea excretiei renale de calciu, amoniu, fosfat, sodiu, clor, scade excretia de catecolamine im mod semnificativ;
- stare dupa resuscitare: CK ↑, CK – MB ↑, mioglobina ↑;
- stare dupa tuseu rectala: PSA
- valve cardiace mecanice: parametri hemolitici ↑;
- stres/efort psihic: prin eliberarea de adrenalina duc ela cresterea glicogenolizei si a eliberarii de cortizon
- stare prelungita/recoltare de sange in picioare: cresterea nivelului de colesterol cu pana la 10%
- expunere la lumina a probelor: distrugerea rapida a bilirubinei (50%/h prin expunerea la soare);
- aportul de proteine pe termen mediu: uree ↑, acid uric ↑, creatinina ↑ (subordonat);
- dieta ovo-lacto-vegetariana: reducerea semnificativa a valorilor colesterolului corespunzator varstei;
- abuzul de alcool: cresterea gamma – GT, MCV, GPT (usoara crestere in cazul consumului unic, moderat de alcool); consum cronic de alcool: GOT > GPT;
- fumatul: concentratia CEA ↑ , continut CO al hemoglobinei ↑, colesterol ↑, anticorpi antinucleari ↑
- lipsa de expunere la soare (de exemplu, in timpul iernii): niveluri de vitamina D ↓
*medicina de laborator
Dimensiuni ale tuburilor si volume de probe
Tuburile BD Vacutainer sunt disponibile in trei dimensiuni diferite, fiecare cu un volum diferit, asa cum se arata mai jos.
Tuburile pentru analize speciale pot avea o dimensiune diferita (de ex. tuburi de sedimentare) .
Volumul dat in mL al tubului se refera la cantitatea de sange care va fi prelevata de la pacient. Pentru tuburile cu un aditiv fluid, volumul final poate fi diferit (cantitatea de sange + aditiv).
Ordinea recoltarii si manipularea tuburilor
Montigen va pune la dispozitie intreaga gama de Vacutainere BD:
Recoltarea sangelui venos
Analiza coagularii
Tuburi BD Vacutainer Citrat
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
363047 | 1,8 ml | PET | Transparent+albastru |
363097 | 1,8 ml | PET | Transparent+albastru |
363048 | 2,7 ml | PET | Albastru |
363079 | 2,7 ml | PET | Albastru |
364305 | 2,7 ml | PET | Albastru |
367704 | 4,5 ml | Sticla | Albastru |
367714 | 4,5 ml | Sticla | Albastru |
366575 | 6 ml | Sticla | Albastru |
Tuburi BD Vacutainer CTAD
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
367562 | 2,7 ml* | Sticla | Albastru |
367599 | 4,5 ml | Sticla | Albastru |
*Tub cu volum absorbit partial
Recoltarea sangelui venos
Analiza serului
Tuburi BD Vacutainer biochimie
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368492 | 2 ml* | PET | Rosu transparent |
368271 | 2 ml* | PET | Rosu transparent |
365904 | 4 ml | PET | Rosu |
369032 | 4 ml | PET | Rosu |
367624 | 5 ml | Sticla | Rosu |
368815 | 6 ml | PET | Rosu |
367896 | 10 ml | PET | Rosu |
*Tub cu volum absorbit partial
Tuburi biochimie cu gel separator si clot activator
Tuburi BD Vacutainer SST II
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
366882 | 2,5 ml* | PET | Galben |
367957 | 3,5 ml | PET | Galben |
367955 | 5 ml | PET | Galben |
367953 | 8,5 ml | PET | Galben |
*Tub cu volum absorbit partial
Tuburi BD Vacutainer cu trombina
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368771 | 4 ml | PET | Portocaliu |
368774 | 5 ml | PET | Portocaliu |
Recoltarea sangelui venos
Analiza plasmei
Tuburi BD Vacutainer Lithiu Heparina / Sodiu Heparina
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368494 | 2 ml* | PET | Verde transparent |
368884 | 4 ml | PET | Verde |
367869 | 4 ml | PET | Verde |
368886 | 6 ml | PET | Verde |
368889 | 6 ml | PET | Verde |
367876 | 6 ml | PET | Verde |
367526 | 10 ml | PET | Verde |
*Tub cu volum absorbit partial
Tuburi heparina cu gel separator
Tuburi BD Vacutainer PST II
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368497 | 3 ml | PET | Verde deschis |
367374 | 3 ml | PET | Verde deschis |
367376 | 4,5 ml | PET | Verde deschis |
367378 | 8 ml | PET | Verde deschis |
Recoltarea sangelui venos
Analiza glucozei
Tuburi BD Vacutainer pentru determinarea glucozei si acidului lactic
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368920 | 2 ml* | PET | Transparent+gri |
368520 | 2 ml* | PET | Transparent+gri |
368521 | 4 ml | PET | Gri |
368921 | 4 ml | PET | Gri |
368201 | 5 ml* | PET | Gri |
*Tub cu volum absorbit partial
Recoltarea sangelui venos
Hematologie
Tuburi BD Vacutainer K2EDTA
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368841 | 2 ml* | PET | Transparent+roz |
368856 | 3 ml* | PET | Transparent+roz |
368861 | 4 ml | PET | Mov |
367862 | 4 ml | PET | Mov |
367864 | 6 ml | PET | Mov |
367525 | 10 ml | PET | Mov |
*Tub cu volum absorbit partial
Tuburi BD Vacutainer K3EDTA
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
367836 | 2 ml | PET | Transparent+roz |
368857 | 3 ml* | PET | Transparent+roz |
368860 | 4 ml | PET | Mov |
*Tub cu volum absorbit partial
Recoltarea sangelui venos
Tuburi speciale
Tuburi BD Vacutainer EST
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
362725 | 3 ml | PET | Transparent+rosu |
Tuburi BD Vacutainer pentru determinarea elementului de urmarire
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
368380 | 6 ml | PET | Bleumarin |
368381 | 6 ml | PET | Bleumarin |
Tuburi BD Vacutainer cu trombina
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
367756 | 6 ml | Sticla | Galben |
366645 | 8,5 ml | Sticla | Galben |
Recoltarea sangelui venos
Tuburi BD Vacutainer VSH
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
366676 | 1,8 ml | Sticla | Negru |
367740 | 1,6 ml | Sticla | Negru |
367741 | 2,4 ml | Sticla | Negru |
366674 | 5 ml | Sticla | Negru |
366666 | 5 ml | Sticla | Negru |
Conservarea celulelor si biomarkerilor
Tuburi pentru recoltarea sangelui BD CPT (tub pentru pregatirea celulelor)
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
362781 | 4 ml | Sticla | Negru+Albastru |
362782 | 8 ml | Sticla | Negru+Albastru |
362780 | 8 ml | Sticla | Rosu+Verde |
Tuburi pentru recoltarea sangelui BD PPT (tub pentru pregatirea plasmei)
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
362791 | 5 ml | PET | Alb+rosu |
362795 | 5 ml | PET | Alb+rosu |
362799 | 8,5 ml | PET | Alb+rosu |
Tub PAXgene pentru ADN din sange
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
761165 | 2,5 ml | PET | Alb+bleumarin |
Tub PAXgene pentru ARN din sange
Cod | Volum | Material | Culoare dop |
762165 | 2,5 ml | PET | Transparent+rosu |